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卡梅德生物(KMD?Bioscience)多年來致力于蛋白表達、制備及其相關領域的研究,我們的科學家能夠為您提供全方位的蛋白相關問題的解決方案。蛋白互作研究過程中,常需要找到蛋白或酶的配體,因此迫切需要一種高通量篩選方案,可以滿足廣大科研用戶的需求??返律锾峁┑?/span>噬菌體展示平臺是一種超高通量的配體篩選方式,通過該技術平臺可以構建多達1013/ml個經過噬菌體展示的多肽或抗體克隆,平均可以做到獨立克隆數為109-1010/ml,經過后續多輪淘篩可以提供多達105有效多肽或抗體的序列,為后續酶底物,蛋白配體和高特異性抗體搜尋提供堅實的研究基礎。同時,配合卡梅德生物的親和力篩選平臺,可以在短時間內(2-3天)獲得不同的多肽或抗體與靶點蛋白目標的親和力排序,甚至精準親和力的測定都可以完成(親和力測定服務,詳情請查看親和力測定服務?;谑删w平臺,卡梅德生物可以為客戶構建隨機7肽文庫,12肽文庫,15肽文庫等,能夠充分滿足客戶的不同需求。
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卡梅德生物致力于為客戶提供多肽文庫構建的優質服務。
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圖1 肽庫構建原理及流程(以抗體庫展示為例)
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T7噬菌體:
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T7噬菌體是Podoviridae家族的一種二十面體病毒,具有線性雙股(ds)DNA基因組。與T4類似,噬菌體T7擁有一個頭和尾的結構。二十面體頭部,即T7保存其dsDNA基因組的地方,由415個拷貝的衣殼蛋白gp10組成,在表面排列為60個六聚體,在頂點排列為11個五聚體。主要的衣殼蛋白gp10有兩種異構體,gp10A和gp10B,比例為9比1,是由341個氨基酸的自然翻譯框架轉移造成的。
小蛋白gp10B的產生是由于基因末端的框架轉換,使帽狀蛋白多出52個殘基。融合蛋白顯示在蛋白gp10B的C端,多出的52個殘基。T7噬菌體顆粒在各種極端條件下表現出高穩定性,包括高溫和低pH值,這有利于有效地進行高通量親和洗脫。最近,T7噬菌體展示系統的應用在揭示分子相互作用的機制方面發揮了作用,特別是在抗原發現、疫苗開發、蛋白質相互作用以及癌癥診斷和治療領域。
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圖2 噬菌體展示肽庫
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卡梅德生物提供的肽庫構建流程:
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流程 |
服務項目 |
核苷酸序列合成 |
隨機合成客戶指定長度的核苷酸序列 |
聚合和酶切 |
合成的DNA序列進行聚合和酶切 |
電轉化文庫制備 |
制備 ER2738宿主菌,然后用構建良好的重組質粒轉化大腸桿菌 |
肽庫容量和多樣性檢測 |
通過菌落計數檢測抗體庫容量,以及通過測序檢測抗體庫多樣性 |
噬菌體展示多肽文庫制備 |
通過感染 T7噬菌體包裝肽庫 |
交付 |
冰袋郵寄 |
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卡梅德生物提供的肽庫構建服務:
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卡梅德生物憑借豐富的經驗以及完善的噬菌體展示技術平臺,可以為客戶提供多種不同長度,不同特性的肽庫定制服務,以滿足客戶的需求。我們提供使用T7噬菌體系統的定制肽庫構建和篩選(卡梅德生物提供肽庫或抗體庫篩選服務)項目的特色服務。
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服務優勢:
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--卡梅德生物構建的多肽文庫可高通量生產
--廣泛地應用于多肽藥物的研發,準確的定位抗原決定簇
--可溶抗原的快速制備能力:結合公司現有的重組蛋白表達體系,能夠在短時間內制備出高純度、高生物學活性的可溶抗原蛋白,用以支持噬菌體抗體的免疫及篩選工作
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如何訂購?
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