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        人源抗體噬菌體文庫制備服務

        卡梅德生物(KMD?Bioscience)多年來致力于抗體領域研究??贵w噬菌體展示文庫一直是全人源治療性抗體研發的強有力工具。我們搭建了成熟的噬菌體抗體展示文庫構建平臺,利用該平臺可以為客戶提供不同級別,不同物種的抗體噬菌體展示文庫。我們的科研團隊有著豐富的知識積累和數年的項目經驗,能夠在較短周期內構建高庫容量的噬菌體展示文庫??返律锾峁┗谑删w展示技術的一站式科研服務,包括從噬菌體抗體庫構建和篩選、抗體人源化改造、到抗體親和力成熟、制備特異性單克隆抗體等。

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        抗體文庫制備服務人源抗體噬菌體展示文庫制備:

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        噬菌體展示技術(phage displayed technology)是指利用共表達方式,將外源蛋白基因,如抗體片段、多肽片段等的cDNA連接在噬菌體表面結構蛋白基因VIII或基因III上進行菌體外展示表達。該技術是由Smith,G.P在1985年提出,通過吸附-洗脫-擴增的重復過程,將含有靶蛋白噬菌體從表達各種外源蛋白的噬菌體庫中篩選出來,然后進行富集、擴增及基因序列測定,推斷外源蛋白的氨基酸組成。

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        圖1 噬菌體展示技術

        天然人源抗體是指收集未經免疫的人源外周血淋巴單核細胞,進行一系列的基因克隆,將抗體的CDR區域克隆拼接到噬菌體衣殼蛋白基因上進行展示,通過重復吸附-洗脫-擴增等過程,將含有高特異性和高親和力抗體片段的噬菌體從噬菌體庫中篩選出來,然后進行富集、擴增及基因重組構建單克隆抗體。

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        噬菌體展示系統:

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        卡梅德生物擁有M13,T4和T7噬菌體展示體系,根據客戶的項目需求(展示的蛋白或抗體片段的大小等參數),會采用不同的噬菌體進行蛋白或者抗體的展示。在已完成的案例中,基于M13噬菌體pIII基因展示體系較為常用,構建的庫容量可以達到1011,其中有效庫容量為109。同時,客戶也可以提供抗原,進行體外外周血淋巴單核細胞敏化,以獲得更高親和力和特異性的單克隆抗體,通?;谠摲椒ㄖ苽涞目贵w親和力能達到10-13 M級別。

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        技術流程:

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        我們的噬菌體抗體展示文庫平臺優勢:

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        --可溶抗原的快速制備能力:結合公司現有的重組蛋白表達體系,我們能夠在短時間內制備出高純度、高生物學活性的可溶抗原蛋白,用以支持噬菌體抗體的免疫及篩選工作

        --成熟穩定的免疫文庫構建技術:目前我們獲得的噬菌體一級免疫文庫的庫容可高達108-109,序列豐度超過99%,獲得的抗體親和力達到nM或pM級別

        --快速可靠的候選抗體篩選及初步鑒定技術:根據不同的抗體藥物功能需求,開發了多種篩選體系,包括直接篩選法、競爭法、負篩選發、細胞篩選法等

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