卡梅德生物科技（天津）有限公司
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卡梅德生物（KMD?Bioscience）多年致力于蛋白相互作用研究，蛋白質相互作用能夠揭示分子之間的相互作用模式，是蛋白質結構與功能研究中的一個重要方向。我們擁有豐富的重組標簽蛋白表達經驗，能夠在原核和真核表達系統為客戶表達帶有GST，Myc-tag， Flag-tag，HA-tag等標簽的重組蛋白；同時，卡梅德生物擁有精密的檢測設備及成熟的技術，我們的免疫共沉淀以及Pull Down技術來源于日本京都大學IPS實驗室，保證了實驗的準確性?？返律飯猿譃榭蛻籼峁└咂焚|的服務內容，能夠提供從重組蛋白制備到pull down蛋白互作檢測等一站式技術服務，滿足不同客戶的需求。
Pull Down實驗服務是在體外條件下檢測分子間相互作用的方法。通過該技術可以驗證蛋白間的相互作用或篩選獲取相應的目的蛋白。Pull down實驗與免疫共沉淀技術相似，不同之處在于免疫共沉淀技術是用抗體交聯磁珠或瓊脂糖，該技術則利用蛋白與蛋白，蛋白與其他生物分子之間的相互作用進行目標分子的捕捉和研究。其原理是帶有標簽的誘餌蛋白被特異結合該標簽的固相化親和配基捕獲，產生“次級親和支持物”，用于純化與誘餌蛋白相互作用的其他蛋白。通過SDS-PAGE電泳分析，或結合Western blot驗證和LC-MS/MS，對純化洗脫后的蛋白復合物進行進一步鑒定，就能檢測出與誘餌蛋白相互作用的蛋白質。
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卡梅德生物已經建立并完善了GST融合蛋白pull-down技術和鏈霉素標記pull-down技術，這兩種技術分別用于蛋白與核酸（RNA/DNA）的研究。
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免疫學檢測服務 —GST pull-down實驗：
GST Pull-down又叫做蛋白質體外結合實驗，是在體外條件下驗證或尋找蛋白質間相互作用的方法。
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項目 |
GST pull-down實驗 |
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實驗原理 |
* 該技術是利用了GST對谷胱甘肽(GSH)偶聯球珠的親和性，首先采用重組表達技術表達帶有GST(谷胱甘肽轉移酶)標簽的“魚餌”蛋白，再利用該魚餌蛋白和細胞裂解液進行孵育，捕獲能夠與魚餌蛋白結合的靶分子，然后加入帶有谷胱甘肽（GSH）標記的瓊脂糖珠子，GSH在GST的催化作用下將蛋白復合物鏈接到瓊脂糖珠子上，低速離心收集上述復合物從而進行后續SDS-PAGE等分析 |
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應用 |
* 可證明預測的蛋白質-蛋白質間可能存在的相互作用
* 尋找與已知蛋白發生相互作用的未知分子 |
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優點 |
* 多采用標簽（如GST）抗體來檢測，適用范圍廣
* 操作簡單，是可直接檢測蛋白質間相互作用的有效方法 |
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GST pull-down 實驗流程：
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免疫學檢測服務 —?RNA/DNA pull-down實驗：
RNA/DNA pull-down是研究體外條件下RNA或DNA與蛋白互作的重要技術。
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項目 |
RNA/DNA pull-down實驗 |
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實驗原理 |
* 該技術是通過體外轉錄目的RNA的一部分或全長，用生物素標記RNA/DNA探針，與胞漿蛋白提取液孵育，形成RNA/DNA—蛋白質復合物。再利用鏈親和素標記的磁珠或瓊脂糖珠，將上述復合物從細胞裂解中分離開來。然后進行洗脫，SDS-PAGE或銀染等驗證靶標分子 |
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應用 |
* 可驗證某種蛋白與目的RNA/DNA是否有相互作用
* 純化的蛋白經質譜鑒定，即可篩選到與目的RNA結合的蛋白 |
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優點 |
* 該技術是捕獲RNA/DNA-蛋白復合體的常用方法 * 能夠進行目的RNA或DNA的互作蛋白驗證或篩選，如驗證或尋找特定基因的轉錄因子 |
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RNA/DNA pulldown 實驗流程：
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服務優勢：
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--熟練的實驗操作水平，設置對照和重復，排除隨機干擾因素影響，保證結果更加可靠
--使用銀染技術，靈敏度更高，SDS-PAGE電泳結果更加清晰
--具有成熟的蛋白平臺，提供pull down 產物，融合質粒，SDS-PAGE結果和Western Blot結果
--完整的信息分析，提供詳細的實驗報告，可提供蛋白質鑒定結果（質譜結果）
--能夠提供從GST蛋白制備到蛋白互作檢測的一站式服務，節省客戶寶貴時間
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