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卡梅德生物(KMD?Bioscience)多年來致力于重組蛋白表達與制備研究。蛋白質標記技術能夠幫助我們研究感興趣的蛋白質豐度、相互作用、翻譯后修飾、功能等問題。我們擁有經驗豐富的技術團隊,積累了充足的蛋白標記經驗,憑借成熟的標記技術和配套的儀器設備,可為客戶提供高品質的蛋白質標記服務。
卡梅德生物建立了一套完整的標記策略和計算方案,我們具有廣泛的標簽和結合物的選擇,在擁有多種選擇的基礎上,為您提供合適的標簽服務。根據客戶的特定需求,能夠為客戶提供個性化解決方案,選擇適合的標記物或標記方式,優化標記方法。
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蛋白標記服務內容:
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--蛋白酶標記服務:
蛋白標記服務中的酶標記物通常是指辣根過氧化物酶(HRP)和堿性磷脂酶(AP標記),這兩種標記物常被用于標記抗體后用在ELISA檢測。
卡梅德生物采用的HRP和AP均來自sigma公司,根據豐富的蛋白定量經驗,能夠采用合理的方案將蛋白與酶的標記比例接近1:1,以獲得準確的結果。此外,我們也為廣大科研人員提供生物素標記服務。
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類型 |
服務內容 |
HRP標記 |
* HRP由多個同功酶組成,分子量為40,000,等電點為PH 3-9,酶催化的適合PH因供氫體不同而稍有差異,但多在PH 5左右
* HRP較適用于快速顯色反應,ELISA檢測中加入底物5-10分鐘內即可到達OD450值1.8-2.5左右 |
AP標記 |
* AP標記物較適用于慢速顯色反應,顯色時間約4-8個小時,催化形成的黃色化合物比較穩定,適合酶促動力學的定量檢測 |
生物素(Biotin)標記 |
* 生物素既可以作為融合標簽與目的蛋白進行重組表達,以便后續純化和篩選工作,如進行噬菌體文庫篩選時,其具有很高的篩選效率,同時也適用于IHC的組織特異性表達監測;
* 蛋白進行生物素(Biotin)標記后,可以直接應用于IP,磁珠分選 |
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--蛋白同位素標記服務:
蛋白同位素標記是經典的一種蛋白示蹤和蛋白組學定量技術,與體外標記技術相比,同位素標記技術屬于體內標記。
* 原理:用天然同位素(輕型)或穩定同位素 (重型)標記的必需氨基酸取代細胞培養基中相應氨基酸,細胞經5-6個倍增周期后,穩定同位素標記的氨基酸全部摻入到細胞新合成的蛋白質中替代了原有氨基酸。不同標記細胞的裂解蛋白按細胞數或蛋白量等比例混合,經分離、純化后進行質譜鑒定,根據一級質譜圖中兩個同位素型肽段的面積比較進行相對定量。
卡梅德生物自有蛋白表達平臺結合我們的細胞培養平臺,能夠為客戶提供13C,15N,15N-13C,35S和3H的蛋白同位素標記服務。 蛋白同位素標記服務也可以使用125I和131I,蛋白中的酪氨酸可通過 HPLC 或開管柱色譜(取決于碘化分子的特性)進行標記,并去除其中的游離碘,將放射性碘標記到蛋白和其他分子上,放射性碘用作示蹤劑或探針。通常,使用 TLC 法檢測標記產物,以保證游離碘的百分比<5%。
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--蛋白熒光標記服務:
熒光染料標記蛋白/多肽技術是常見的蛋白體外標記技術,除了GFP,GYP等融合表達熒光蛋白之外,目標蛋白經過熒光染料標記可以直接進行活體示蹤,細胞分選等。對于每一個需要標記的多肽或蛋白,我們技術人員會嚴格評估多肽或蛋白的物化性質,如多肽標記,linker長度,類型交聯位置??返律锛夹g能夠提供的熒光染料標記服務包括:
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FITC、FAM、RBITC |
膠體金標記Co-Au、Cy3、Cy5、Cy5.5、Cy7 |
APC、PE |
Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488、Alexa Fluor 555、Alexa Fluor 594、Alexa Fluor 647 |
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--蛋白量子點標記服務:
我們提供以無機結構ZnCdSe/ZnS為核心的量子點標記技術服務:
羧基和氨基水溶性量子點(圖A):使用聚合物對油溶性量子點的表面修飾而得到,可以均勻的分散于水溶液中(如硼酸鹽緩沖、PBS緩沖溶液等),表面羧基和氨基具有反應活性,粒徑范圍12~18nm。
油溶性量子點(圖B):通過疏水配體對無機結構ZnCdSe/ZnS表面的包覆,量子點可以均勻的分散于非極性有機溶劑中(如己烷、甲苯、氯仿等),使其更容易進行加工。粒徑范圍5 ~10 nm,油溶性量子點通過封裝后可以作為LED背光光源,增強顯示色域;另外,對油溶性量子點進行表面修飾引入活性基團后,可以與生物分子進行偶聯,應用于生物標記/檢測、高通量編碼、活體成像及動態示蹤等領域。
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--蛋白磁珠標記服務:
磁性納米球(MNS)是以高分子聚合物為核,表面包覆有磁性納米粒子、帶有功能基團(羧基、氨基)的納米球系列產品。該系列產品具有分散性好、磁響應快、表面功能基團豐富、偶聯容易、分離簡單等特點,可廣泛應用于核酸純化、蛋白純化、親和層析、細胞分選、免疫分析和臨床診斷等多個生物醫學領域。
--蛋白PEG標記服務:
梅德生物提供不同分子量的PEG標記服務,具體詳情請見蛋白PEG修飾服務。
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服務優勢:
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--嚴格的質控體系,技能嫻熟的實驗技術人員,豐富的標記經驗
--多種類型的標記物和標記方式可供選擇
--成熟的技術路線,優化的實驗流程,保證較高的蛋白標記成功率
--提高檢測靈敏度,簡化檢測工作流程
--完整的上下游服務:可提供重組蛋白表達與制備、蛋白測序,蛋白標記修飾等一站式技術服務,節約客戶寶貴時間和成本
--服務可定制:根據客戶需求制備,為客戶提供包括信息咨詢,詳細實驗方案的設計與實施等相關服務
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